Prueba PCR para Cardiopatía Isquémica

Se realizo una PCR-RFLP, que es la reacción en cadena de la polimerasa con enzimas de restricción. Todo con el fin de determinar la genotificación de una cardiopatía isquémica. se utilizaron cuatro polimorfismos:  G-174C y G-572C de la interleucina-6 y C-511T y C+3953T de la interleucina-1.

La obtención del ADN genómico se realizó mediante la extracción de sangre recogidas en tubos EDTA. El ADN fue cuantificado por espectrofotometría y diluido hasta una concentración de 20 ng/µL, posteriormente, las regiones que contienen el sitio polimórfico fueron amplificadas por PCR. 

• Los parámetros del ciclado para IL-1 fueron 94 °C por 3 minutos y luego 35 ciclos de 95 °C por 2 minutos, 53 °C por 1 minuto y 74 °C por 1 minuto, seguidos de una a extensión final a 72 °C por 5 min.
• Los parámetros del ciclado para IL-6 fueron 94 °C por 10 minutos y luego 35 ciclos de 95 °C por 1 minuto, 55 °C por 1 minuto 35 segundos y 72 °C por 1 minuto, seguidos de una a extensión final a 72 °C por 10 min.

 Finalmente los productos de amplificación fueron digeridos con enzimas de restricción específicos, luego separados por electroforesis horizontal en geles de agarosa y teñidos con Gel Stain.

Únicamente el polimorfismo G-174C de la interleucina-6 tuvo una asociación estadísticamente significativa con la cardiopatía isquémica generando un riesgo 4 veces superior de desarrollar esta enfermedad, mientras que los tres polimorfismos restantes no confieren riesgos.

Fuente: https://dialnet.unirioja.es/servlet/articulo?codigo=7072712